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最近小編發(fā)現(xiàn)國標(biāo)規(guī)定的樣品前處理方式以氮吹、旋蒸居多,而為實驗室所試用看好的真空離心濃縮儀卻沒能進(jìn)去?
真空離心濃縮儀是利用抽真空降低溶劑沸點(diǎn),靠真空泵的抽真空和/或輔以冷阱及時收集所蒸發(fā)出來的蒸氣來完成去除溶劑、干燥/濃縮樣品的目的的。本身因為持續(xù)抽真空,真空條件下溶劑沸點(diǎn)降低,樣品溫度也會降低,能有效保證樣品活性的;一定的離心力會使樣品始終沉淀在容器底部,幾乎沒有任何損失;又能同時處理很多樣品,小編感覺比氮吹、旋蒸等在樣品處理量上、保證樣品活性上、濃縮效率上都強(qiáng)多了,用戶試用之后反映是很好的,估計還是知道的人少吧?之前很多在宣傳強(qiáng)調(diào)凍干、加上國標(biāo)推薦旋蒸和氮吹儀等因素,所以真空離心濃縮才顯得低調(diào)。
氮吹是在常溫常壓下對一些易揮發(fā)的溶劑如低沸點(diǎn)乙醇等濃縮的;真空離心濃縮儀是可以對中、高、低沸點(diǎn)的溶劑都可以通過真空控制來實現(xiàn)溶劑濃縮的,我從自身對這儀器的了解來看,覺得是個好儀器,既能保證樣品活性,又比凍干快好幾倍,比旋蒸和氮吹儀等處理樣品量大多了。而且也信任專業(yè)制造商的軟件和數(shù)據(jù)了,對優(yōu)化實驗方案很有幫助?。?!
真空離心濃縮儀在設(shè)計上需運(yùn)用“控制真空”的關(guān)鍵特點(diǎn),樣品量沒什么大的限制,這也是比冷凍干燥法優(yōu)勢的一個特點(diǎn)(冷凍干燥需要樣品厚度1cm左右,要不凍干過程會特慢),實際上盛放樣品的容器是放置離心真空濃縮儀主機(jī)的離心轉(zhuǎn)子上的,轉(zhuǎn)子有一定傾斜角度,所以考慮到傾斜后液面有一定坡度可能會流出來的情況,只要裝得不是太滿就成,足可以裝95%左右。濃縮儀體積大小不一樣、所配的真空泵不一樣、有沒有加冷阱、主機(jī)加熱溫度不一樣、設(shè)置真空度不一樣都會影響濃縮效率,比如,用普通濃縮儀濃縮核酸里的乙醇,濃縮70ml大約半個小時吧,要是紅外加熱的大機(jī)子,也就幾分鐘的事。
從使用者角度來看,就是希望明明白白地知道實驗進(jìn)展,面板顯示參數(shù)多,很方便優(yōu)化調(diào)整實驗方案;
真空濃縮關(guān)鍵是真空的控制,----配個好泵,沒控制功能就靠泵一個勁兒地抽的話,溫度降得太低導(dǎo)致樣品結(jié)冰蒸發(fā)就成升華了,成凍干了,那么速率就絕對慢下來了;配個差泵,樣品溫度高了就容易導(dǎo)致樣品變性,所以真空控制絕對需要,再針對儀器面板的顯示數(shù)據(jù)加以調(diào)整設(shè)置真空度和加熱溫度,那樣品處理起來絕對高效,所以我本人是更傾向于自選泵來組合一套濃縮系統(tǒng),而不是買別品牌的自帶內(nèi)置泵的濃縮系統(tǒng),內(nèi)置泵系統(tǒng)的雖然一開始選儀器能省點(diǎn)心,但日后做實驗出點(diǎn)情況,換泵啥的都不方便,再就是有幾個廠家的真空離心濃縮系統(tǒng)的真空控制功能要么沒有,要么不標(biāo)配,要么顯示真實數(shù)據(jù)不那么全面啦,然后可勁兒地在離心速率上、轉(zhuǎn)子上彌補(bǔ),搞得參數(shù)看著很強(qiáng)悍,但忽略了實質(zhì)性的真空的重要性。
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